Механизмы ауторегуляции объема клеток эпителия в гипотонических условиях

В 15:00, в пятницу 14 апреля 2017 г, в ауд. 306, состоится семинар «Биофизика клетки». Ольга Пономарчук (биофак МГУ) сделает доклад оо регуляции объема клеток эпителия и возможной роли ионов Ca2+.

Аннотация

Несмотря на тот факт, что накоплен большой объем данных по механизмам регуляции объема в клетках, многие аспекты этого процесса, например молекулярная природа сенсоров изменений объема, активирующих RVI и RVD, остаются не исследованными. Сравнительно недавно нами было установлено, что в остутствии целостной плазматической мембраны биогель цитоплазмы ведет себя как осмосенсор. Белки трехмерного цитосклета клеток являются одним из основных компонетов цитоплазмы. В ранних исследованиях нами было обнаружено что целостность цитосклелета нарушается в результате плавления составляющих его белков при 48–49оС. В этой связи мы сопоставили действие химических модификаторов цитоскелета и температруной предобработки на свойства цитоплазмы как биогеля и RVD клеток эпителия. В литературе увеличение концентрации внутриклеточного кальция ([Cа2+]i) рассматривается в качестве одного из основных механизмов активации ионных каналов, вовлеченных в RVD. Однако хотелось бы отметить противоречивость полученных данных в зависимости от типа клеток или применяемых методов. В самом деле, методы, применяемые на суспензиях клеток или требующие длительных инкубаций, не подходят в связи с гетерогенностью клеток и быстрыми кинетиками изменениями объема. Часто эксперименты проводятся не на одиночных клетках, а в монослоях, где флуктуации [Cа2+]i выражены по-разному внутри популяции. Противоречивый характер может быть результатом проведения экспериментов по измерению объема и [Cа2+]i раздельно во времени. Учитывая выше упомянутые ограничения, для поставленных задач мы использовали метод реконструкции поверхности с помощью 2-х изображений (Double Image Surface Reconstruction (DISUR), а также модифицировали его для возможности одновременного измерения изменений клеточного объема и [Cа2+]i.